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品牌:贝克曼库尔特(Beckman Coulter),隶属于丹纳赫集团(Danaher),是全球生命科学和临床诊断领域的巨头。
产地:美国(核心光学系统与精密液流系统在美国原厂设计制造,部分型号在中国设有组装线)。
CytoFLEX SRT(Sorting)是一款全光谱、全自动、高通量的流式细胞分选仪。其核心功能是基于细胞表面或内部的荧光标记,从复杂的混合细胞群体中,高速、高纯度地分离出目标细胞。它不仅具备分析功能(检测细胞表达什么),更具备物理分选功能(把想要的细胞“抓”出来),支持无菌分选、单细胞分选和96孔板分选,是细胞生物学、免疫学、肿瘤学研究的工具。
全光谱(Full Spectrum)检测技术:这是CytoFLEX系列的核心优势。它采用32通道高灵敏度PMT检测器,配合的CytoFLEX光学引擎,能够采集从紫外(375nm)到近红外(785nm)的全波长荧光信号。这意味着它无需像传统流式那样依赖固定的滤光片组合,通过软件算法(SpectroFlo)即可从复杂的荧光染料重叠(Spillover)中解算出真实的信号,完美支持多色(可达30色以上)复杂实验。
声波聚焦分选(Acoustic Focusing):这是SRT型号区别于传统“液滴充电”(Charge-and-Deflect)分选技术的革命性创新。它利用声波驻波(Standing Wave)在液流中对细胞进行无接触、无压力的物理聚焦,使细胞在进入分选点时排列成完美的单列。这种技术带来的好处是极低的剪切力(对细胞活性损伤最小,分选后细胞存活率>95%)、极高的分选纯度(>99%),且完全避免了传统分选因高压导致的液滴带静电问题(Aerosol),生物安全性极高。
全自动校准与监控(AFC & AQC):仪器内置全自动光路校准(AFC)和自动液流监控(AQC)系统。开机后仪器自动完成激光器功率校准、PMT电压优化和液流延迟时间计算,无需人工干预,大大降低了操作门槛和人为误差。
智能防堵设计:具备自动液流反冲(Backflush)功能和智能堵点检测,当检测到液流异常时自动执行清洁程序,减少实验中断。
免疫学与肿瘤免疫:从肿瘤微环境(TME)中分选稀有的免疫细胞亚群(如CAR-T细胞、Treg细胞、肿瘤浸润淋巴细胞TILs)进行单细胞测序或功能验证。
干细胞与再生医学:分选高纯度的多能干细胞(iPSCs)、造血干细胞(HSCs)用于移植或分化研究。
单细胞组学:将单个细胞精确分选至96孔板或384孔板中,用于单细胞基因组学、转录组学(scRNA-seq)或蛋白质组学分析。
微生物学:分选环境样本中的特定细菌或古菌。
药物筛选:高通量筛选表达特定蛋白的细胞克隆。
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参数类别 |
规格(CytoFLEX SRT 标准配置) |
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激光器配置 |
标配3激光(405nm, 488nm, 638nm),可扩展至5激光(增加561nm, 355nm) |
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检测通道 |
支持32个荧光检测通道(全光谱采集) |
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分选技术 |
声波聚焦分选(Acoustic Assisted Cell Sorting, AACS) |
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分选模式 |
1路(单管)、2路(双管)、4路(四管)、96孔板、单细胞(Index Sorting) |
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分选速度 |
可达 70,000 事件/秒(Events/s) |
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分选纯度 |
> 99% (对于稀有细胞群体) |
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分选回收率 |
> 90% (细胞活性保持率高) |
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喷嘴尺寸 |
可选 70μm, 100μm, 130μm (适应不同细胞大小) |
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细胞大小兼容性 |
2μm - 40μm (可处理细菌、血小板至大细胞团) |
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样本压力 |
低至 2-4 PSI (传统分选仪通常为 20-70 PSI,对细胞更温和) |
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液流系统 |
全封闭、无菌管路(可选生物安全柜兼容版) |
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软件系统 |
CytoExpert SRT Software(支持21 CFR Part 11合规性) |
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尺寸(WxDxH) |
约 90 cm x 80 cm x 150 cm (占用空间小于传统大型分选仪) |
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重量 |
约 180 kg |
生物安全:虽然声波分选产生的气溶胶极少,但操作人类原代细胞、病毒转导样本或潜在病原体时,必须在II级生物安全柜(BSC)内进行,或选购专用的生物安全版(Biosafety Cabinet Enclosure)。
样本制备:分选对样本要求极高。细胞悬液必须无细胞团块、无纤维蛋白、无大量死细胞碎片。建议使用40μm或70μm滤膜过滤样本,否则极易堵塞70μm的微小喷嘴,导致分选中断。
鞘液与耗材:必须使用无颗粒、无菌的专用鞘液(Sheath Fluid)和0.22μm过滤的PBS。严禁使用自来水或含钙镁离子的缓冲液,以免结晶堵塞管路。
染料兼容性:全光谱技术虽然强大,但进行多色(>15色)实验时,仍需进行严格的荧光补偿(Compensation)和光谱 unmixing。建议使用单染对照管进行光谱库建立。
环境要求:仪器对振动极其敏感。必须放置在绝对平稳、无振动的防震台上。实验室温度应恒定在18-25°C,湿度40%-60%,避免激光器过热。
强烈推荐购买 CytoFLEX SRT 的场景:
需要高活性细胞的研究:如干细胞分选后需要继续培养、T细胞分选后做杀伤实验。声波分选的温和特性是。
稀有细胞分选(<0.1%):如循环肿瘤细胞(CTCs)、抗原特异性T细胞,其高纯度(>99%)至关重要。
共享平台或核心设施:操作人员流动性大,全自动校准(AFC)能保证不同用户得到一致的结果,降低维护成本。
空间有限的实验室:相比BD FACS Aria或MoFlo等“大铁柜”,SRT体积更紧凑。
建议购买分析版(CytoFLEX LX)的场景:
实验室只需要看数据,不需要把细胞分出来。分析版价格仅为分选版的1/3至1/2。
预算有限,且分选需求可通过商业外包(CRO)解决。
不推荐购买场景:
需要分选极大细胞(>40μm):如卵母细胞、神经元球,可能需要更大喷嘴的传统分选仪。
极端高通量(>100,000 events/s):传统液滴分选在绝对速度上仍有优势。
全新机市场参考价(2026年,中国含税):
基础3激光配置(405/488/638):人民币 280万元 - 350万元。
高配5激光全光谱配置(含355nm紫外):人民币 400万元 - 500万元。
价格波动因素:
激光器数量:每增加一个激光器(如561nm黄色激光),价格增加约40-60万元。
生物安全附件:专用的生物安全柜罩(Enclosure)或HEPA过滤模块,价格约20-40万元。
服务包:是否包含3-5年的白金级延保(Platinum Service Plan)会显著影响成交价。
二手市场:较为,且声波分选核心部件(压电陶瓷)有寿命限制,二手评估需极其谨慎。
标准保修:1年现场保修,包含所有硬件故障和上门校准。
延保服务(推荐):贝克曼提供 Platinum Service Plan(白金服务计划)。强烈建议购买3-5年延保,价格约为仪器原价的8%-12%/年。包含:
每年2次预防性维护(PM):工程师上门清洁液路、校准光路、更换易损件(如O型圈)。
4小时响应:承诺在报修后4小时内提供远程诊断或备件发货。
软件无限升级:终身免费升级CytoExpert软件。
应用支持热线:专属的应用科学家提供实验方案设计支持。
耗材保障:原厂鞘液、清洁液、喷嘴均有严格的批次追溯,确保分选稳定性。
CytoFLEX SRT 的操作流程高度自动化,但分选前的样本准备和参数设置至关重要。以下是标准操作流程(SOP)示意图:
CytoFLEX SRT 分选标准操作流程(SOP)
[Day 0: 开机准备] 1. 开启主电源 -> 2. 执行 "Startup"(仪器自动进行液路灌注和光路校准AFC)-> 3. 等待状态灯变绿(约30分钟) [Day 1: 样本设置] 1. 装载样本管 -> 2. 在软件中创建新实验 -> 3. 绘制散点图(FSC vs SSC, 荧光通道)-> 4. 设置门(Gating):P1 (细胞群) -> P2 (目标阳性群) [分选参数设置] 1. 点击 "Sort Layout" -> 2. 选择分选模式:单管 / 96孔板 / 单细胞 -> 3. 设置分选条件:Purity (高纯度) 或 Yield (高回收) 或 Enrich (富集) -> 4. 设置收集液(如含血清的培养基) [执行分选] 1. 点击 "Start Sort" -> 2. 仪器自动计算液流延迟(Drop Delay)-> 3. 实时监控分选速率和纯度 -> 4. 分选完成后自动执行 "Shutdown"(清洗管路) [关机] 1. 执行 "Standby"(短期不用)或 "Shutdown"(长期不用)-> 2. 关闭电源
注:完整的英文版操作手册(Part Number B76555AC)可从MyBeckman门户网站下载,中文版需向当地工程师索要。严禁在未接受正式培训前操作分选仪。