产品基本信息

品牌与产地

品牌：伯乐（Bio-Rad Laboratories, Inc.），全球领先的生命科学与临床诊断产品制造商。

产地：美国（原厂设计制造，核心高压模块与电路系统在美国加州赫拉克勒斯生产）。

核心功能

BD LSRFortessa X-50 是一款超高端台式多色分析型流式细胞仪（High-Parameter Analyzer）。其核心功能是实现的多参数细胞表型与功能分析。它不具备物理分选（Sorting）能力，但专注于在单细胞水平上解析的复杂信息。主要功能包括：

1. 超高维数据分析：支持5激光系统，最多可同时检测50个参数（2个散射光 + 48个荧光），能够一次性描绘出细胞极其精细的“身份指纹”。

2. 深层次免疫表型：能够同时分析数十种表面标志物、趋化因子受体、活化状态标志物，用于发现新的细胞亚群（如组织驻留记忆T细胞、先天样淋巴细胞）。

3. 全光谱流式（Spectral）兼容性：X-50型号是BD在传统PMT（光电倍增管）技术上的巅峰之作，虽然本身是传统流式，但其高通道数设计为与全光谱流式（如BD FACSDiscover S8）进行数据比对和验证提供了基础。

4. 高速高通量分析：分析速度可达100,000事件/秒，配合自动进样器（HTS），可快速处理大量样本，适用于大规模单细胞图谱绘制（如Human Cell Atlas项目）。

技术特点

1. 模块化光学系统（MOS）：这是LSRFortessa系列区别于FACSCanto的核心。光路不再是完全固定的，而是采用模块化设计。用户可以根据实验需求，像搭积木一样更换不同的滤光片和分光镜（Dichroic Mirrors），从而自由定义每个检测器的波长范围，最大化利用激光能量和荧光染料。

2. 5激光固态激发源：标配或可选配5根高功率固态激光器，覆盖从紫外到远红外的全光谱范围（355nm UV, 405nm Violet, 488nm Blue, 561nm Yellow-Green, 640nm Red）。这种配置确保了有足够的“光学空间”来容纳48种荧光染料而不发生严重的光谱重叠。

3. 高灵敏度PMT阵列：配备了多达30个独立的高量子效率PMT检测器。每个检测器都经过精密校准，确保在检测微弱信号（如转录因子、磷酸化蛋白）时具有极低的背景噪音。

4. 数字信号处理（DSP）：全数字化采集系统，支持脉冲宽度（Width）和高度（Height）分析，能有效去除粘连细胞（Doublets），确保单细胞数据的纯净度。

5. 自动化液流控制：智能液流系统能自动调节压力以适应不同粘度的样本（如全血、组织消化液），并自动进行样本间冲洗，将交叉污染率降至（<0.1%）。

应用领域

• 高维免疫学（High-Dimensional Immunology）：细胞因子风暴研究、肿瘤微环境（TME）免疫细胞浸润分析、自身免疫病机制探索。

• 单细胞多组学前端验证：作为单细胞RNA测序（scRNA-seq）或单细胞ATAC测序（scATAC-seq）的“金标准”验证工具，用于确认分选群体的纯度或验证测序发现的表面标志物。

• 药物研发与生物标志物发现：在抗体药物筛选（ADC, BiTE）中，同时评估靶点表达、内化效率、杀伤效应和免疫调节功能。

• 干细胞与发育生物学：多能性标志物组合分析、谱系追踪、罕见干细胞亚群鉴定。

产品图片

https://www.bdbiosciences.com/dam/bdb/products/instruments/flow-cytometers/lsrfortessa/lsrfortessa-01.png.thumb.1280.1280.png

（图示：仪器体积较大，通常配备双显示器，正面有自动进样器托盘，侧面有模块化光学舱门）

产品参数

详细参数

注意事项

1. 实验设计复杂性：30色实验不是简单的染料叠加。必须进行严格的光谱重叠矩阵（Spillover Spreading Matrix, SSM） 计算。在购买前，实验室必须配备精通流式配色原理（如Fluorochrome Spectra Viewer工具）的专家，否则大量通道的串色（Spillover）会导致数据无法解读。

2. 样本制备要求极高：30色抗体染色对样本的洁净度、细胞活性、非特异性结合（Fc Blocking）要求极为苛刻。任何微小的死细胞或碎片都会在30个通道中产生巨大的背景噪音。必须使用高浓度的活力染料（如Live/Dead Fixable染料）和彻底的洗涤步骤。

3. 开机校准耗时：虽然仪器稳定，但5激光30色配置的开机预热和CS&T（Cytometer Setup and Tracking）质控流程比普通仪器长（约30-45分钟）。每日必须运行质控微球以验证所有30个检测器的性能。

4. 维护成本：30个PMT和5根激光器的维护成本远高于普通3激光仪器。紫外激光器（355nm）寿命相对较短（约5,000-8,000小时），更换费用昂贵。

5. 数据存储压力：一个30色的FCS文件体积巨大（通常50-100MB/样本），对电脑硬盘（建议SSD）和服务器备份空间提出了极高要求。

应用与建议

购买建议

• 强烈推荐购买场景（必选X-50）：

  • 科研机构或国家实验室：致力于绘制人类细胞图谱（Human Cell Atlas）或进行系统免疫学（Systems Immunology）研究。

  • 肿瘤免疫学中心：需要同时分析肿瘤细胞、T细胞、B细胞、髓系细胞、基质细胞等超过15种细胞类型的复杂相互作用。

  • 核心设施共享平台（作为旗舰机）：需要一台“镇场之宝”来满足PI们最前沿的多色实验需求，与分选仪（如FACSAria）和光谱仪（如FACSDiscover）形成技术互补。

• 可考虑低配版（如X-20）场景：

  • 主要做20色以内的实验，且预算有限。X-20（4激光20色）性价比更高。

  • 实验室已有光谱流式细胞仪，购买LSRFortessa仅作为传统流式的对照和验证平台。

• 不推荐购买场景：

  • 临床常规检测：医院检验科做TBNK或白血病分型，完全不需要30色，购买FACSCanto II或CytoFLEX更经济实用。

  • 新手实验室：没有流式专家坐镇，购买此仪器等于“大炮打蚊子”，且极易因操作不当导致光路损坏或数据混乱。

价格标准

• 全新机市场参考价（2026年，中国含税）：人民币 450万元 - 650万元。

  • 价格波动极大，完全取决于激光器和检测器的数量：

    • 基础配置（3激光10色）：约180万-250万（但通常不会这样买LSRFortessa）。

    • 标准高配（5激光20-25色）：约350万-480万。

    • 顶配（5激光30色，含高功率UV激光和全自动进样器）：约550万-650万。

• 二手/翻新机价格：极其罕见，且风险高。若有，价格约200万-300万元（需第三方工程师全面检测UV激光器寿命）。

服务与保障

• 标准保修：1年现场全保（On-site Comprehensive Warranty）。BD工程师上门安装、调试复杂的MOS光路模块，并提供高级应用培训（多色配色设计）。

• 必须购买的延保：BD Care Platinum Program（白金计划）。对于X-50这种复杂仪器，强烈建议购买5年延保。价格约为仪器总价的12%-18%/年。包含：

  • 每季度1次预防性维护（PM）：清洁光学模块，检查激光器功率衰减。

  • 7x24小时紧急响应：备件库中常备昂贵的UV激光模块。

  • 性能优化服务：定期帮助用户重新优化滤光片配置以适应新的染料面板。

• 软件支持：FACSDiva软件支持复杂的光路配置（Cytometer Configuration），保修期内免费升级。

使用说明书

BD LSRFortessa的操作高度依赖FACSDiva软件，其硬件手册极为复杂。以下为针对30色实验的特殊操作要点示意图：

BD LSRFortessa X-50 30色实验操作核心流程

[实验前 - 配色设计（必须在软件外完成）]
1. 使用BD Fluorescence Spectrum Viewer在线工具 -> 2. 选择5激光30色 -> 3. 分配染料，确保每个染料在检测器上的信号，串色最小 -> 4. 导出配色表（Template）

[每日开机 - 长流程]
1. 开启激光器（提前30分钟预热，特别是UV激光） -> 2. 运行CS&T微球 -> 3. 软件自动生成30个通道的Voltage Target值 -> 4. 运行补偿微球（如UltraComp eBeads） -> 5. 在Diva中建立30x30的补偿矩阵（Comp Matrix）并保存

[上样检测]
1. 加载配色模板 -> 2. 使用低流速预览样本，检查所有通道是否有信号 -> 3. 切换到高流速采集 -> 4. 实时监控“Spillover Spreading”指标，若某个通道溢出过大，需中止实验调整配色

[关机]
1. 运行“Shutdown”程序（含去离子水冲洗和消毒液浸泡） -> 2. 务必关闭UV激光器电源（以延长寿命） -> 3. 关闭主机

注：完整的使用说明书是一套包含《硬件安装指南》、《MOS配置手册》、《FACSDiva高级操作手册》的文档集，需从BD官网下载或向工程师索要。